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在細(xì)胞培養(yǎng)中遇到培養(yǎng)液pH值變化太快,怎么辦
    細(xì)胞培養(yǎng)是指在體外模擬體內(nèi)環(huán)境(無菌、適宜溫度、酸堿度和一定營養(yǎng)條件等),使之生存、生長、繁殖并維持主要結(jié)構(gòu)和功能的一種方法。細(xì)胞培養(yǎng)看重的就是無菌操作,無菌操作是細(xì)胞培養(yǎng)是否成功的關(guān)鍵點(diǎn)。凡是放入超凈臺(tái)中的不是一次性使用的物品事先都需要經(jīng)過高壓滅菌;不能進(jìn)行高壓處理的物品也需要經(jīng)過75%的乙醇消毒。包括酒精燈、吸管、移液器、試管架、培養(yǎng)皿、廢液缸等。

培養(yǎng)液pH值變化太快,怎么辦?

可能造成的原因:

1.CO2張力不對(duì);

2.培養(yǎng)瓶蓋擰得太緊;

3.NaHCO3 緩沖系統(tǒng)緩沖力不足;

4.培養(yǎng)液中鹽濃度不正確;

5.細(xì)菌、酵母或真菌污染。

解決方法:

1.按培養(yǎng)液中NaHCO3濃度增加或減少培養(yǎng)箱內(nèi)CO2濃度,2.0g/L3.7g/L濃度NaHCO3對(duì)應(yīng)CO2濃度為5%到10%或者改用不依賴CO2培養(yǎng)液

2.松開瓶蓋1/4

3.HEPES緩沖液至1025mM終濃度

4.CO2培養(yǎng)環(huán)境中改用基于Hanks鹽配制的培養(yǎng)液,在大氣培養(yǎng)環(huán)境中培養(yǎng)改用Hanks鹽配制的培養(yǎng)液

5.丟棄培養(yǎng)物或用抗生素除菌

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