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今日淺談動(dòng)物源性DNA檢測(cè)試劑盒的操作步驟
       動(dòng)物源性DNA檢測(cè)試劑盒是為專業(yè)的高通量實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)的,但是現(xiàn)在這種試劑盒是適合中低等通量的實(shí)驗(yàn)室使用,這個(gè)試劑盒專門為每天需要制備的樣品量達(dá)到100個(gè)的實(shí)驗(yàn)室而設(shè)計(jì)。
  建議使用試劑配套動(dòng)物基因組DNA提取系列產(chǎn)品,具體過程詳見產(chǎn)品說明書。剪下所需測(cè)試數(shù)的已含有反應(yīng)液的PCR管,放置在室溫待解凍后,離心30秒后揭開封口膜,向每管反應(yīng)液中分別加入5μL模板,順序?yàn)镹G、待測(cè)樣品模板。蓋好配套的PCR管蓋后,渦旋混勻30秒,離心1分鐘,立即進(jìn)行PCR擴(kuò)增反應(yīng)。
  1、需要按試劑準(zhǔn)備中描述的方法,配制好動(dòng)物源性DNA檢測(cè)試劑盒各種組分的工作液。
  2、所有試劑和組分都先恢復(fù)到室溫,標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控品和樣品,建議做復(fù)孔。
  3、從鋁箔袋中取出所需板條,剩余的板條用自封袋密封放回冰箱。
  4、設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔、樣本孔和空白孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL,樣本孔加待測(cè)樣本50μL,空白孔不加。
  5、用封板膜蓋住反應(yīng)板,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60分鐘。
  6、除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,加入過氧化物酶標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL。
  7、揭開封板膜,棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置20s,甩去洗滌液,吸水紙上拍干。
  8、將底物A和B按1:1體積充分混合,所有孔中加入底物混合液100μL,用封板膜蓋住反應(yīng)板,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育15分鐘;
  9、如此重復(fù)4次,若使用自動(dòng)洗板機(jī),請(qǐng)按洗板機(jī)操作程序進(jìn)行洗板,添加浸泡20秒的程序,可以提高檢測(cè)的精度。洗板結(jié)束,加底物前,要在干凈不掉屑的紙上,充分拍干反應(yīng)板。

上海睿玥實(shí)驗(yàn)器材有限公司主營(yíng)產(chǎn)品:全自動(dòng)熔點(diǎn)測(cè)定儀,梯度PCR基因擴(kuò)增儀,平行反應(yīng)合成儀
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