本試劑盒采用直接裂解試劑和陶瓷珠機(jī)械破碎的原理,可以獲得260/280nm >1.8的細(xì)菌DNA溶液, 可直接用于qPCR的檢測。 操作步驟較經(jīng)典的DNA提取方法簡化很多,對非分子生物學(xué)背景的操作員,一樣可以輕松完成。
操作步驟:
1. 在1.5ml離心管內(nèi)加入1ml菌液,并于5000 x g 離心5分鐘。(如挑取菌落,可直接進(jìn)入步驟3 。)
2.用真空抽吸儀或移液器吸除上清,注意不要碰到細(xì)菌沉淀。
3.加入500ul清洗液混勻沉淀,并于12,000× g離心3分鐘。
4.用真空抽吸儀或移液器吸除上清,注意不要碰到細(xì)菌沉淀。
5.加入300ul 快速提取試劑 ,渦旋混勻后轉(zhuǎn)移至含有陶瓷珠的離心管。
6.以渦旋混勻儀的最高速振蕩5分鐘。
7.于95℃加熱10分鐘。
8.于12000g離心2分鐘,取200ul上清即可用于qPCR,或-20℃保存。
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